Четвертичная структура днк Четвертичная структура днк

ДНК-полимераза эпсилон (Pol эпсилон) из состоит из четырех субъединиц (Pol2, Dpb2, Dpb3 и Dpb4) и имеет важное значение для репликации хромосомной ДНК. Биохимические характеристики ПОЛ эпсилон были громоздкими из-за чувствительности протеазы и были представлены ограниченным количеством Пол эпсилон в клетках.

Мы разработали протокол для сверхэкспрессии и очистки Пол эпсилон из S.cerevisiae,. Четвертичная структура днк была очищена до гомогенности с помощью обычной хроматографии. Pol эпсилон характеризуется биохимическими экспериментами по скорости осаждения и экспериментами гель-фильтрации.

По коэффициенту седиментации (11,9 с) и радиуса Стокса (74,5 А), молекулярной массы на ГСМ эпсилон 371 кДа, рассчитывается соответствие с рассчитанной молекулярной массой 379 кДа для гетеротетрамер. Кроме того, аналитические эксперименты позволяют равновесие поддержать предложенную гетеротетрамерную структуру Пол эпсилон путем ультрацентрифугирования. Таким образом, ДНК-полимеразы дельта и Pol эпсилон очищают мономерные комплексы, в соответствии с накоплением доказательств того, что Pol дельта и Pol эпсилон расположены напротивоположных нитей эукариотической вилки репликации.