Трансформация днкТрансформация днк

Трансформация днк представляет собой процесс получения рекомбинантного вектора из реакционной смеси, или вектором раствора в клетках E.coli. с помощью компетентных клеток. Способ получения компетентных клеток зависит от используемого метода преобразования и требуемой эффективности трансформации.

Для высокой эффективности трансформации, мы используем электропорации и электропорации-компетентные клетки. Если низкая эффективность достаточна, мы используем трансформацию теплового шока и химически компетентных клеток. Превращение лигирования смеси должно быть сделано в клонировании деформации recA-, таких как DH5a, NovaBlue или XL1-Blue.

В зависимости от фона не-рекомбинантов (из смеси лигирования, содержащей только переваренного вектора), число трансформантов (3-12) должно быть определено и проверено на присутствие правой вставки с помощью рестрикционного анализа или ПЦР колоний.

Трансформация вектора для умножения также должна быть сделана в штамме recA-, таких как DH5, NovaBlue или XL1-Blue. Преобразование вектора для экспрессии белка должно быть сделано в соответствующем хосте экспрессии.